生化試劑盒
- 脂肪酸合成酶（FAS）試劑盒-紫外分光光度法
- 恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛，涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富，涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀，分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格，所有這些保證了我們向您提供的最專業最優質的服務。
| 中文名稱 |
脂肪酸合成酶（FAS）試劑盒 |
| 規格 | 24樣 |
| 貨號 |
L-762-SH |
| 價格 | ￥2000 |
| 樣本類型 | 血清，血漿，組織勻漿，細胞裂解液、細胞培養上清液等 |
| 檢測范圍 | 詳見說明書 |
| 檢測方法 |
紫外分光光度法 |
| 貨期 | 3-5天 |
| 說明書 | 咨詢我司業務員獲取 |
| 文獻 | 咨詢我司業務員獲取 |
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義：
FAS是脂肪酸合成關鍵酶，催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中，在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。
測定原理：
FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+；NADPH在340nm有吸收峰，而NADP+沒有；通過測定340nm 光吸收下降速率，計算FAS活性。
自備儀器和用品：
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體25mL×1瓶，－20℃保存。用前1 d取出置于4℃充分解凍后混勻。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入550 μL試劑四，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入550 μL試劑四，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑四：液體25mL×1瓶，4℃保存。
試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入1050 μL試劑四，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿。12000g，4℃離心40min，取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后12000g，4℃，離心40min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體：直接測定。
FAS測定操作：
1. 分光光度計預熱30min，調節波長到340 nm，蒸餾水調零。
2. 試劑四置于40℃水浴中預熱30 min。
3. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、20μL試劑二、20μL試劑三、820μL試劑四和40μL試劑五，迅速混勻后于340nm處測定吸光值，記錄第30s和90s時吸光值，分別記錄為A1和A2。△A測=A1-A2。
FAS活性計算公式：
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADPH 為1個酶活單位。
FAS(nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△A÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADPH 為1個酶活單位。
FAS(nmol/min/g 鮮重) = (△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷W
（3）按細胞數量計算
活性單位定義：37℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADPH 為1個酶活單位。
FAS(nmol /min/104cell) = (△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細胞數量
（4）按液體體積計算
活性單位定義：37℃中每毫升樣本每分鐘氧化1nmol NADPH 為1個酶活單位。
FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε：NADPH摩爾消光系數，6.22×103/mol/cm；d：比色皿光徑，1 cm；V反總：反應體系總體積，1000μL=0.001 L；Cpr：上清液蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；V樣：加入反應體系中上清液體積，100μL=0.1 mL；T：反應時間，1min。
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