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生化試劑盒

游離膽固醇(FC)含量試劑盒-可見分光光度法
恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛,涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀,分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的最專業最優質的服務。

中文名稱

游離膽固醇(FC)含量試劑盒-可見分光光度法    

規格 48樣
貨號

L-742-SH

價格 ¥180
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養上清液等
檢測范圍 詳見說明書
檢測方法

可見分光光度法

貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業務員獲取
文獻 咨詢我司業務員獲取

    正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

FC是構成細胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質激素性激素膽汁酸維生素D生理活性物質的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標。

 

測定原理:

FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O24-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。

 

自備儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、異丙醇和蒸餾水。

 

試劑組成和配

試劑一:異丙醇50mL(自備);

試劑二:液體50mL×1瓶,4℃保存;

試劑三粉劑×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體100μL×1瓶,4℃保存;

標準品:液體1mL×1支,濃度為0.5 μ mol/mL4℃保存。

 

FC的提取:

1、組織:按照組織質量(g)試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min,取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌:先收集400-500萬細胞或細菌到離心管內,棄上清,加1mL試劑一,超聲波破碎1min(強度20%,超聲2s,停1s),即FC待測液。

3.血清(漿)樣品:直接測定。

 

測定操作:

1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到500 nm,蒸餾水調零。

2.FC工作液的配制:臨用前,吸取約0.8mL試劑二分別加入試劑三和試劑四瓶中,充分溶解后再全部轉移回試劑二瓶中,充分混勻,FC工作液置于37℃水浴10min用不完的工作液4℃保存一周。

3. 標準管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC標準液和900μL FC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測定A標準管。

4. 測定管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC待測液和900μL FC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測定A測定管。

5、空白管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL 試劑一900μL FC工作液,混勻,37℃靜置3h500nm測定A測定管。

注意:

1、 標準管和空白管只需測定一次。

2若測定管產生白色渾濁,可以將待測液用異丙醇稀釋2~5倍后測定,并在最后結果乘以相應倍數。

 

 

計算公式:

1. 血清(漿)FC含量計算:

FC含量(μmol /dL= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)×100mL

=50×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)

C標準液:0.5μmol/mL100 mL1dL=100 mL

2. 組織FC含量計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算

FC含量(μmol / mg prot= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

                       = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

FC含量(μmol / g鮮重= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

                  = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

C標準液:0.5μmol/mLCpr樣本蛋白濃度mg/mLW:樣本質量,g/mL

3. 細胞、細菌中FC含量計算:

FC含量(μmol /104 cell= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell /L

=0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell /L

C標準液:0.5μmol/mL。

最低檢出限為1nmol/mL


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